頂空氣相色譜系列講座（6）
苯類化合物的頂空色譜分析（6）
頂空色譜分析的條件實驗
l 色譜條件：選用毛細柱有利將鄰、對、間二甲苯得到*分離，中等偏弱極性的毛細色譜柱均可用，極性不同程序升溫也要相應改變。如SE-54（25m×0.25mm×0.25μm）；柱溫70℃保持3min，以5℃/min升至100℃，保留2min；進樣口溫120℃；檢測器溫（GC/FID）180℃；載氣（N2）97kpa；燃氣（H2）138kpa；助燃氣（空氣）207kpa；樣品溫80℃，樣品保溫平衡時間20~25min ，進樣增壓時間5s，柱分流比為10:1
l 回收率測定：取25μL苯類標準稀釋液兩份，一份加1.0mL生理鹽水即0.9%醫(yī)用鹽水，（做水中回收率），另一份加0.5mL生理鹽水和0.5g空白肝組織（做肝中回收率）
苯類化合物的回收率表
峰號 化合物名稱 回收率 標準偏差 變異系數(shù)
水中 肝中 μL/mL %
2 苯 91 88 2.4 1.1
3 甲苯 96 93 4.9 2.2
4 乙苯（內(nèi)標） - - - -
5 間二甲苯 94 91 0.55 0.2
6 對二甲苯 95 93 0.75 0.51
7 鄰二甲苯 102 100 5.85 2.6
l 線性范圍和相關系數(shù)：分別取苯類標準稀釋液5、10、20、25、50μL五份，各加1mL生理鹽水，在相同前述條件下進行頂空色譜分析，苯、甲苯、乙苯（內(nèi)標）、二甲苯測得結果見圖，本實驗定量檢測限（μg/mL）苯為2、甲苯為10、二甲苯為30.。
l 鹽效應篩選：取苯類標準稀釋液6份，每份25μL，分別加入1mL各5%NaCl、CuSO4、K2CO3、KAl（SO4）2、NaAc和生理鹽水，用內(nèi)標計算結果KAl（SO4）2溶液使苯系列的活度系數(shù)相對增加較大，但考慮增加值相差不多，而生理鹽水的得到、使用、純度也合要求又方便，我們更喜歡用0.9% NaCl生理鹽水。
l 保溫時間對響應的影響：取苯類標準稀釋液25μL共七份，各添加1mL生理鹽水，在樣品溫度80℃下，分別保溫時間為10、20、30、40、50、70min和480min，然后進樣內(nèi)標計算結果20~30min為好，保溫480min之久的樣品，有許多組分已測不出來了。
l 同時做了二只體重2kg白兔實驗，使其空腹16h后，灌服苯類混合標準溶液（苯:甲苯:二甲苯=5:10:15）30mL，10min后大小便失禁，30min內(nèi)再無其他癥狀變化，以后出現(xiàn)呼吸急促發(fā)顫，6h后擊腦處死，立即解剖進行分析，結果各臟器含量遞減順序如下：
苯——胃內(nèi)容→胃→血→肝→腦→肺→腸內(nèi)容→腎→膀胱→眼液→心→膽→腹肌肉→腿肌肉→大腸→脾；
甲苯——胃內(nèi)容→腸內(nèi)容→胃→腦→肝→腎→膀胱→小腸→心→膽→大腸→腹肌肉→眼液→腿肌肉→脾
二甲苯——胃內(nèi)容→腸內(nèi)容→胃→腦→肝→膀胱→小腸→腎→大腸→心→膽→腹肌肉
